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細(xì)胞熒光染色實(shí)驗(yàn)

產(chǎn)品簡(jiǎn)介

利用抗原抗體反應(yīng)，鑒定細(xì)胞是否表達(dá)某種蛋白。細(xì)胞經(jīng)固定后，用特異性抗體（一抗）識(shí)別目的蛋白，再用一抗的抗體（二抗）識(shí)別一抗，二抗一般耦聯(lián)熒光基團(tuán)或化學(xué)反應(yīng)基團(tuán)，通過熒光或化學(xué)發(fā)光顯示目的蛋白。
細(xì)胞熒光染色實(shí)驗(yàn)是常見細(xì)胞實(shí)驗(yàn)之一。

產(chǎn)品型號(hào)：

更新時(shí)間：2026-03-20

廠商性質(zhì)：代理商

訪問量：1658

產(chǎn)品咨詢 15221734409

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1. 固定

4% 多聚甲醛室溫固定 15–20 min
PBS 洗 3×5 min

2. 通透（胞內(nèi)蛋白必須做）

0.1% Triton X-100 室溫 10 min
PBS 洗 3×5 min

膜蛋白不用通透。

3. 封閉

5% 牛血清白蛋白（BSA）或山羊血清
室溫封閉 30–60 min，減少非特異性結(jié)合

4. 一抗孵育

滴加一抗（按說明書稀釋，通常 1:100–1:1000）
4℃ 濕盒過夜
次日 PBS 洗 3×5 min

5. 二抗孵育

熒光二抗（FITC 綠 / Cy3 紅 / Alexa 系列）
室溫避光孵育 1 h
PBS 洗 3×5 min

6. 核復(fù)染

DAPI 染色 5 min
PBS 洗去多余染料

7. 封片

抗熒光淬滅封片劑封片
4℃ 避光保存，盡快拍片

結(jié)果判讀

DAPI（藍(lán)）：所有細(xì)胞核
目標(biāo)蛋白（綠 / 紅）：陽(yáng)性表達(dá)部位
共定位：黃色（紅綠疊加）
可半定量：

平均熒光強(qiáng)度（Mean Fluorescence Intensity, MFI）
陽(yáng)性細(xì)胞比例

上一個(gè)：細(xì)胞磁珠分選實(shí)驗(yàn)

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細(xì)胞熒光染色實(shí)驗(yàn)

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2. 通透（胞內(nèi)蛋白必須做）

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4. 一抗孵育

5. 二抗孵育

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