流式細胞術(shù)實驗

產(chǎn)品簡介

流式細胞術(shù)實驗流式細胞術(shù)工作原理是在細胞分子水平上通過單克隆抗體對單個細胞或其他生物粒子進行多參數(shù)、快速的定量分析。它可以高速分析上萬個細胞，并能同時從一個細胞中測得多個參數(shù)，具有速度快、精度高、性好的優(yōu)點，是當(dāng)代的細胞定量分析技術(shù)之一。
流式細胞術(shù)（三標(biāo)）實驗是常見細胞實驗之一。

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更新時間：2026-03-20

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主要組成部分與工作流程

1. 樣本制備：獲得單細胞懸液

這是實驗成敗的關(guān)鍵。需要制備出細胞分散良好、無團塊、活性高的單細胞懸液。
來源：培養(yǎng)的細胞系、血液、骨髓、淋巴結(jié)、脾臟、實體瘤組織等。
對實體組織，常需酶消化（如膠原酶、胰酶）和機械分散。

2. 熒光標(biāo)記：用熒光染料偶聯(lián)的抗體“標(biāo)記"細胞

這是實現(xiàn)“多參數(shù)"分析的基礎(chǔ)?？贵w特異性結(jié)合細胞表面或內(nèi)部的靶蛋白。
直接染色：使用偶聯(lián)了熒光染料的抗體直接標(biāo)記。
間接染色：使用未標(biāo)記的一抗，再用熒光標(biāo)記的二抗進行檢測（較少用，易增加非特異性背景）。
胞內(nèi)染色：如需檢測細胞因子、磷酸化蛋白等，需先固定和破膜。

3. 上機檢測：流式細胞儀運行

細胞懸液在鞘液的包裹和聚焦下，形成單細胞流通過流動室。

激光照射：一束或多束不同波長的激光（如488nm藍激光， 405nm紫激光， 640nm紅激光）照射細胞。
信號檢測：細胞被激發(fā)后產(chǎn)生多種信號，被不同的探測器接收：

前向散射：反映細胞的相對大小。
側(cè)向散射：反映細胞的內(nèi)部顆粒度和復(fù)雜性。
散射光信號：
熒光信號：熒光染料被激發(fā)后發(fā)射的特定波長熒光，反映目標(biāo)分子的表達水平。每個熒光通道對應(yīng)一種標(biāo)記物。